二次筛选

二次筛选旨在确证初步高通量筛选发现的“苗头化合物”，并进一步测定其生物活性；简言之，二次筛选有助于将苗头化合物转变为治疗用先导化合物。

在筛选过程的这一阶段，研究人员虽乐于接受提高二次筛选效率的方法，但与高通量设置相比，他们更看重可靠、高度灵敏的分析技术。

二次筛选试验主要进行功能性组织或细胞试验；例如 ELISA（酶联免疫吸附测定）法，可鉴定出阻断受体配体相互作用的抗体。手动操作 ELISA 法时，用户间的操作可变性或冲洗及孵育次数不一致可导致某些问题，而这将直接造成检测结果的错误。

流式细胞术作为另一种二次筛选中的常用技术，可提供多种功能参数测量。流式细胞术样品制备步骤繁琐，涉及多次样品或试剂的添加、清洗及离心分离。自动化有助于解决 ELISA 法及流式细胞术工作流中出现的问题。

二次筛选需分离蛋白质配体复合物，此类可靠技术的空白亟待填补。研究人员通常采用繁琐耗时的速率区带密度梯度离心法，这种离心法从铺设不连续梯度开始；但其再现性差，而自动化可轻松解决这一问题。

自动化消除操作瓶颈

Biomek 工作站提供灵活的自动化解决方案，适用于各种二次筛选工作流。可提供单通道至 96 通道多种移液选项，可灵活设置吸头靠臂及混合等移液步骤。配备可配置台面布局并完美集成其他设备，优化工作站效用。

通过不连续密度梯度离心实现蛋白质配体纯化等过程极为繁琐，而 Biomek 4000 工作站可将其优化为简易的自动化操作过程。采用自动化方法，研究人员可实现样品纯化过程无人值守，着手其他重要实验工作。

为进行ELISA XTT 测试，Biomek 工作站通过集成EMax^® Plus 酶标仪（Molecular Devices 公司制造），用于测量在二次筛选过程中细胞经有毒化合物或其他细胞处理后的生长及活性，可实现连续稀释、细胞铺板、XTT 试剂添加及读板等自动化操作。

Biomek 工作站还集成了流式细胞仪。CytoFLEX 流式细胞仪与 Biomek i 系列自动化工作站直接集成，可实现全自动化样品处理和数据采集。工作站在进行连续稀释及处理部分孔板时，可使用多通道吸头选择功能；实现从铺板、药物处理到细胞染色全过程自动化。

任何试验数据的可靠性都取决于样品制备及分析的准确度与精确度。二次筛选自动化可提高通量及实验室运转效率，减少数据错误、手动操作时间及周转时间。其他优点还包括结果可追溯性以及集成其他设备便于下游操作处理。