Apostle MiniMax™ Performance and Data

从血浆中进行 cfDNA 提取以用于液体活检

Apostle MiniMax 有效游离 DNA 提取试剂盒（标准版）是基于磁珠技术的游离 DNA （cfDNA）提取试剂盒。Apostle MiniMax 试剂盒已被证明在手动和自动化工作流程中从人类血浆中纯化 cfDNA。

  • 可处理 1-5mL 血浆样品
  • 与多种采血管兼容
  • 使用该试剂盒提取的 cfDNA 的纯度被证明适用于下游 PCR 应用及 NGS 检测

与多种采血管兼容

图1（下图）：使用 Apostle MiniMax 试剂盒和市场上主流抽提试剂盒（Kit A）从 cfDNA Tube 1和 cfDNA Tube 2 中收集的 1mL 血浆中提取 DNA。同时使用 Apostle MiniMax 试剂盒、市场上主流抽提试剂盒（Kit A）及磁珠提取试剂盒（Kit B）从 EDTA 抗凝管 1mL 血浆中提取 DNA。采用 Quant-iT PicoGreen dsDNA 检测试剂盒（Thermo Fisher）对 DNA 进行定量。Error bar 表示三个重复的标准偏差。对于每个样品，Apostle Max 试剂盒有较高的 DNA 提取产量。使用安捷伦生物分析仪 2100 进行分析 DNA 片段大小，实验证明，从三种不同采血管中提取 DNA，均可获得预期片段大小   cfDNA（±170 bp）。

Genomics cfDNA Yield from Plasma

Figure 1

 

卓越的重现性

图2（下图）：使用 Apostle MiniMax 试剂盒和其他品牌试剂盒从 cfDNA Tube 1 和 cfDNA Tube 2 中收集的 1mL 血浆中提取 DNA，每种方法重复一次，结果显示，采用 Apostle MiniMax 试剂盒提取的两个样品几乎相同，而使用试剂盒 A 提取 DNA 的曲线则明显不同 。使用安捷伦生物分析仪 2100 分析分离的 cfDNA；峰 35 和峰 10380 为内标。

Genomics cfDNA from Plasma Reproducibility

Figure 2

图 3（ A），分别采用 Apostle MiniMax 试剂盒（红色曲线）和市场主流的抽提试剂盒（蓝色曲线）从 4 mL 血浆中分离富集 cfDNA。提取的 cfDNA 使用生物分析仪 2100 分析。图 3（B）显示，分别采用 Apostle MiniMax 试剂盒（红色曲线）和市场主流的抽提试剂盒（蓝色曲线）从 20 mL 尿液中分离富集 cfDNA。提取的 cfDNA 使用生物分析仪 2100 分析，并标出 ~170bp 的主峰。峰 35 和峰10380 是内标。如图示，对于血浆和尿液样本，Apostle MiniMax 试剂盒的表现优于主要替代产品。

Genomics cfDNA Isolation Characterized

Figure 3

DNA 突变检测和 qPCR 验证

在图 4 中，将 20µL 含有 EGFR C2573T>G L858R 突变的 DNA 合成片段（170 bp）掺入 1mL 的 TE 缓冲液（蓝色）或血清（红色），浓度范围为 0.001ng/µL 到 1ng/µL。使用 Apostle MiniMax 试剂盒抽提：A） 扩增曲线，显示突变片段在各个稀释浓度上， 使用 MiniMaxTM 有效游 离 DNA 分离富集试剂盒抽提前和抽提后呈现高度的重叠，B）用突变 DNA 片段标准品原液进行荧光定量 PCR，并得出标准曲 线。将 MiniMaxTM 有效游离 DNA 分离富集试剂盒抽提后产物曲线与之对 比，呈现出 DNA 片段 90% 以上的抽提效率。在图 5中，使用 Aposlte MiniMax 试剂盒和其他市场主流的抽提试剂盒（Kit A）之间的 qPCR 表现进行了比较。如图示，实验证明，从三种不同采血管中提取 DNA，Apostle MiniMax 试剂盒比试剂盒 A 表现更优异。

Genomics cfDNA Mutation Detection

Figure 4

Genomics cfDNA qPCR Performance

Figure 5

DNA 产量投入量增加

在图 6 中，从 Apostle MiniMax EDTA 管中的 1、3 和 5 mL 血浆中提取 DNA。如果使用 Apostle MiniMax 试剂盒，DNA产量会随着投入量增加而增加。使用 Quant–iT PicoGreen dsDNA 检测试剂盒（Thermo Fisher）对 DNA 进行定量。Error bar 表示三个复制的标准偏差。

Genomics cfDNA Yield Input Volume

Figure 6

工作流程视图

Genomics cfDNA Apostle MiniMax Workflow

  1. 血浆裂解
  2. cfDNA 与磁珠结合
  3. 磁珠与污染物分离
  4. 清洗磁珠
  5. 再次清洗磁珠
  6. 洗脱 cfDNA

 

产品：Apostle MiniMax 有效游离 DNA 提取试剂盒（标准版）

Apostle MiniMax 试剂盒可根据您的实验通量需求提供三种试剂盒规格：

PART # NAME PREPS
C40603 Apostle MiniMax™ 50
C40604 Apostle MiniMax™ 10
C40605 Apostle MiniMax™ Large Volume 50

 

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